

[本网讯]日前,受山东省科学技术厅委托,潍坊市科学技术局邀请中国海洋大学唐学玺教授等有关专家对我院李美芹博士主持的山东省优秀中青年科学家科研奖励基金项目“番茄黄化曲叶病毒CP的获得及其DAS-ELISA快速检测技术的研究”进行了验收。专家组听取了课题组的汇报,审查了有关资料,认为项目研究超额完成了合同任务指标,DAS-ELISA技术应用于番茄黄化曲叶病毒的早期检测,病株检测准确率达97.5%以上,成果达到同类研究国内先进水平,同意结题。
该课题项目由我院李博士主持,同时在蔬菜花卉研究所乔宁、刘永光、王兴翠、薛其勤及裴华丽等几位同事的共同努力下,历时两年半顺利完成。
自2008年以来,在山东菏泽、潍坊等番茄产区大面积发现了一种新的毁灭性病毒——番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV),该病毒引起的发病症状与以往的番茄花叶病毒病、黄瓜花叶病毒病不同,病情发展迅猛,危害面积大,给当地番茄生产造成了巨大损失。目前,已造成山东莘县近百个大棚减产或绝产,同时,在淄博、枣庄、东营等地也发现相同症状的番茄病毒病,而且呈现出逐步加重的趋势。由于这类病毒扩散蔓延非常迅速,了解我省该病毒的发生及流行动态具有十分重要意义,为此应尽快建立番茄黄化曲叶病毒的快速检测体系。
运用血清学检测是一种既准确直观又经济简便的途径。目前应用最广的方法是Clark和Adams于l977年建立的双抗体夹心法,现该法被普遍应用于各种植物的病毒检测。研究结果表明,运用DAS-ELISA方法检测病毒,特异性强,重复性好,灵敏度高,适合大规模的检测。但目前为止,在国内外尚未见应用DAS-ELISA技术来检测番茄黄化曲叶病毒的报道。
本研究应用分子生物学的手段克隆番茄黄化曲叶病毒CP基因,实现其原核表达,并用金属层析法纯化CP,再以此作抗原免疫动物,制备出TYLCV的特异性抗血清、抗体、酶标抗体,建立TYLCV的DAS-ELISA检测技术,并构建了TYLCV-CP基因的DAS-ELISA检测试剂盒,为其早期快速鉴定技术提供可靠的技术保障。
该检测技术的成功建立,将为基层农技工作人员和农民提供一种简单、快捷、有效的检测方法,会被广大番茄种植区尤其是保护地番茄种植区的基层农技工作人员和农民广泛接受使用,应用该技术的检测试剂盒组装投产后,具有广阔的市场前景,预计年均使用数量将达1000万个左右(因仅仅山东省寿光市年均番茄种植面积就达10万余亩),产值5000万元以上,为农民降低损失将达上2500万元左右,能够带来可观的经济效益和社会效益。